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Título : Identificación y caracterización de la actividad biológica de los péptidos antimicrobianos sintetizados durante la fermentación sumergida de Bacillus subtilis
Autor: Rafael Madrigal Chavez
Palabras clave : Biología y Química
Química
Tecnología de los Alimentos
Fecha de publicación : 1-nov-2023
Editorial : Universidad Autónoma de Querétaro
Facultad: Facultad de Química
Prográma académico: Maestría en Ciencia y Tecnología de Alimentos
Resumen: Bacillus subtilis es una bacteria que sintetiza compuestos antimicrobianos como lipopéptidos, enzimas líticas y bacteriocinas. Este estudio tuvo como objetivo crecer B. subtilis ATCC 6633 usando diferentes medios de cultivo para mejorar la producción de péptidos antimicrobianos, evaluar su efecto contra patógenos alimentarios e identificar molecularmente uno de los péptidos. Se realizó una cinética preliminar para evaluar el crecimiento de B. subtilis y la relación entre esporulación y producción de péptidos antimicrobianos. Se utilizaron cuatro caldos comerciales: Schaeffer modificado, nutritivo, soya tripticaseína y Luria Bertani, se evaluó el crecimiento y producción de sustancias antimicrobianas cada 72 h. Se utilizó el método de gota en agar suave a partir del extracto libre de células de Bacillus y Micrococcus luteus como indicador, para seleccionar el medio con mejor producción de péptidos antimicrobianos. Se empleó un diseño factorial 3^2, añadiendo extracto de levadura (%): 0.0; 0.5; 1.0 % y la relación Mg2+/Mn2+ (g/L) :0.5/0.1; 1.0/0.2 y 1.5/0.3, a cada uno de los medios. Las variables de respuesta fueron el crecimiento de B. subtilis y la actividad antimicrobiana. La fermentación se realizó a 37±1 °C, pH de 7.0±0.2, a 200±10 rpm. La mayor producción de compuestos antimicrobianos se logró al agregar al caldo soya tripticaseína 1.0% de extracto de levadura y 0.5/0.1 g/L de MgSO4/MnSO4, obteniendo halos de inhibición de M. luteus de 24.40±1.13 mm después de 48 h. El extracto antimicrobiano logró inhibir los patógenos Listeria monocytogenes y Staphylococcus aureus, con zonas de inhibición de 10.70±0.20 mm y 14.20±0.40 mm, respectivamente, aunque Escherichia coli no fue inhibido. Es probable que el péptido antimicrobiano sea la subtilina, ya que la cepa utilizada sólo produce este péptido, lo cual se confirmó mediante la identificación del gen estructural. Los péptidos redujeron la población de S. aureus, inoculado en carne de cerdo almacenada a 4 °C por 10 días, en 2 log UFC/g, respecto al control sin agentes antimicrobianos. Estos resultados sugieren que la acción antimicrobiana de la bacteriocina producida podría tener una aplicación en la industria alimentaria.
URI : https://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/9935
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