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Título : Purificación parcial y caracterización de una molécula fluorescente producida por microorganismos aislados de una caverna
Autor: Lourdes Navarro Nateras
Palabras clave : Molécula
Fluorescente
Caverna
Fecha de publicación : 2016
Editorial : Universidad Autónoma de Querétaro
Facultad: Facultad de Química
Prográma académico: Ingeniería en Biotecnología
Resumen: Actualmente se estima que se han logrado aislar entre un 10 y 15 % del total de los microorganismos en el planeta. La investigación de microorganismos en cavernas es limitada en la actualidad, sin embargo representan un nicho de oportunidad por las condiciones extremas que ofrecen para el desarrollo de vida. En experimentos previos se muestreó dentro de una caverna (20°01¿07¿ N, 97°31¿16¿ O), en Cuetzalan Puebla, México; donde se identificó la presencia de un microorganismo que emite fluorescencia bajo luz UV. Se evaluaron las características morfológicas y se realizó la secuenciación para identificar su género y especie. Debaryomyces hansenii, la levadura resultante, que de acuerdo a la literatura y los experimentos mencionados puede crecer en condiciones limitantes. La autofluorescencia de Debaryomyces hansenni se comprobó por microscopia de fluorescencia. Posteriormente se evaluaron las condiciones de crecimiento más adecuadas y su relación con la síntesis de la molécula fluorescente. En donde se probó que las variables más adecuadas fueron, 20 °C, pH 7, glicerol como fuente de carbono y cloruro de amonio como fuente de nitrógeno, en una relación C/N 7:1. Finalmente la purificación parcial se llevó a cabo en dos etapas: aislamiento del complejo por extracción con solventes orgánicos y cromatografía en capa fina, observando dos compuestos diferentes. Las muestras seleccionadas fueron analizadas para su caracterización por espectrometría infrarroja, espectroscopía raman y resonancia magnética nuclear, los análisis muestran una similitud entre los dos compuestos por la tanto se infiere que se trata de moléculas de la misma familia. Las predicciones en base a las técnicas analíticas realizadas permitieron realizar un acercamiento estructural de la molécula fluorescente, concluyendo que se trata de un compuesto alifático con posibles grupos nitrogenados.
URI : https://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/5987
Otros identificadores : 3106 - RI002984.pdf
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