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Título : Purificación de una toxina recombinante de tipo hidralisina (rPFT) del "coral de fuego" M. alcicornis y determinación de su actividad hemolítica
Autor(es): Ivana Valentina Vielma González
Palabras clave: Biología y Química
Química
Química Farmacéutica
Fecha de publicación : 28-feb-2024
Editorial : Universidad Autónoma de Querétaro
Facultad: Facultad de Química
Programa académico: Licenciatura en Químico Farmacéutico Biólogo
Resumen: El phylum Cnidaria comprende organismos marinos fundamentales en la formación de arrecifes, como los hidrocorales del género Millepora, conocidos como “corales de fuego” debido a sus toxinas que provocan lesiones similares a quemaduras. Estos componentes, principalmente las toxinas formadoras de poros (TFP), poseen un potencial aplicativo en diversos campos. No obstante, aún no hay suficiente información sobre su estructura química o su mecanismo de acción. Recientemente, nuestro grupo detrabajo logró obtener de forma recombinante una TFP del tipo hidralisina del coral defuego M. alcicornis, utilizando como sistema de expresión la cepa de E. coli C41 (DE3). Desafortunadamente, el proceso de purificación de dicha toxina no fue eficiente. Debido a esto, el presente trabajo de tesis tuvo por objetivo purificar la TFPrecombinante mediante cromatografía líquida rápida de proteínas (FPLC), utilizandouna columna de intercambio iónico; como resultado se obtuvieron 8 fracciones, las cuales fueron analizadas mediante electroforesis unidimensional SDS-PAGE. Se encontró que lasfracciones 7 y 8 contenían un par de bandas que se encontraban en un rango de peso molecular entre 25 y 30 kDa, que corresponde al peso molecular de las las TFPs de tipo hidralisina. El rango de peso molecular de las fracciones purificadas sugirió que la proteína recombinante contenía más de una etiqueta de afinidad de polihistidina, lo cual impide una unión específica con una resina de afinidad. Los resultados derivados del presente trabajo de tesis indicaron que el empleo de la cromatografía de intercambio iónico propuesta permitió aislar la rTFP de tipo hidralisina.
URI: https://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/10266
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