Please use this identifier to cite or link to this item: https://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/273
Full metadata record
DC FieldValueLanguage
dc.rights.licensehttp://creativecommons.org/licenses/by-nd/4.0es_ES
dc.contributorCarlos Regalado Gonzalezes_ES
dc.creatorAldo Amaro Reyeses_ES
dc.date2011-02-
dc.date.accessioned2018-12-06T21:38:14Z-
dc.date.available2018-12-06T21:38:14Z-
dc.date.issued2011-02-
dc.identifierEnzimas xilanolíticases_ES
dc.identifierHemicellulosices_ES
dc.identifierHemicelulósicoses_ES
dc.identifierXilanoes_ES
dc.identifierXylanes_ES
dc.identifierXylanolytic enzymeses_ES
dc.identifier.urihttp://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/273-
dc.descriptionLos subproductos agrícolas hemicelulósicos son materiales altamente disponibles, los cuales representan una oportunidad para desarrollar productos de valor agregado. El xilano constituye la segunda fuente más abundante de carbono orgánico renovable de la Tierra, y se encuentra en las paredes celulares de las plantas en forma de hemicelulosa. Las endo- 1,4-ß-D-xilanasas (EC 3.2.1.8) y exo ß-xilosidasas (CE 3.2.1.37) catalizan la hidrólisis del xilano. Existe un interés creciente en la producción de enzimas xilanolíticas para aplicaciones industriales tales como la bioconversión de residuos agroindustriales a biocombustibles, edulcorantes bajos en calorías y productos farmacológicos. En este trabajo se presenta la caracterización parcial de una ß-xilosidasa purificada de A. niger GS1 expresada en un sistema fúngico, y la eficiencia de la producción de xilanasa tanto en fermentación sumergida (FSm) como en estado sólido (FES) mediante la co-transformación homóloga de A. niger AB4.1. Ambas enzimas recombinantes se expresaron en A. niger AB4.1 bajo el control del promotor gdpA y el terminador trpC de A. nidulans. Los sistemas de expresión fueron diseñados para producir enzimas recombinantes conteniendo un péptido de seis histidinas fusionado en su extremo carboxilo para purificarlas mediante cromatografía de afinidad. La ß-xilosidasa mostró un peso molecular de 90 kDa, y actividad de 4280 U mg de proteína-1 a 70°C, pH 3.6. La vida media fue de 74 min a 70ºC, la energía de activación fue de 58.9 kJ mol-1, y a 50°C se observó una estabilidad óptima a un pH de 4.0 a 5.0. Una productividad de 17,1 U L-1 h-1 fue estimada para FES, y 3.2 U L-1 h-1 para FSm calculado en el valor máximo de los títulos de xilanasa. La xilanasa recombinante obtenida por FES con fibra de poliuretano, fue purificada 5.1 veces, con una recuperación de 35.7%, mostró un peso molecular de 30 kDa, y actividad óptima (522 U mg de proteína-1) a pH 5.5 y 50°C. La ß-xilosidasa mantuvo actividad residual por encima de 83% en presencia de 10 mM de DTT, ß-mercaptoetanol, SDS, EDTA y Zn2+. La producción de una xilosidasa libre de hemicelulasas podría ofrecer algunas ventajas en aplicaciones tales como la alimentación animal, la síntesis enzimática y la industria de jugos de frutas. El sistema de expresión, utilizando espuma de poliuretano como soporte inerte, es una alternativa adecuada para la producción homóloga de una endo-xilanasa por FES, en condiciones de expresión selectivaes_ES
dc.descriptionHemicellulosic agricultural by-products are highly available materials, which represent an opportunity to develop value added products. Xylan constitutes the second most abundant source of renewable organic carbon on Earth, and is located in the cell walls of plants in the form of hemicellulose. Endo-1,4-ß-D-xylanases (E.C. 3.2.1.8) and exo-ß-xylosidases (E.C. 3.2.1.37) catalyze the hydrolysis of xylan. There is a growing interest in the production of xylanolytic enzymes for industrial applications such as bioconversion of agro-industrial residues to biofuels, low-calorie sweeteners, and pharmacological products. This work reports the partial characterization of a purified ß-xylosidase from A. niger GS1 expressed on a fungal system and the efficiency of xylanase production under submerged (SmF) and solid-state (SSF) fermentations using the homologous co-transformed A. niger AB4.1. Both recombinant enzymes were expressed in A. niger AB4.1 under control of A. nidulans gpdA promoter and trpC terminator. Expression systems were designed to produce the recombinant enzymes containing a six-histidine peptide fused to the carboxyl end of the proteins to be purified by affinity chromatography. ß-xylosidase showed a molecular weight of 90 kDa, and activity of 4280 U mg protein-1 at 70°C, pH 3.6. Half-life was 74 min at 70ºC, activation energy was 58.9 kJ mol-1, and at 50°C optimum stability was observed at pH 4.0-5.0. A productivity of 17.1 U L-1 h-1 was estimated for SSF, and 3.2 U L-1 h-1 for SmF calculated at peak value of xylanase titers. Recombinant xylanase obtained by SSF on polyurethane fiber, was purified 5.1-fold, with 35.7% recovery, showed a molecular weight of 30 kDa and optimal activity (522 U mg protein-1) at pH 5.5 and 50 °C. ß-xylosidase kept residual activity above 83% in presence of 10 mM DTT, ß- mercaptoethanol, SDS, EDTA and Zn2+. Production of a hemicellulolytic free xylosidase could give some advantages in applications such as animal feed, enzymatic synthesis and the fruit juice industry. The expression system, using PF as inert support, is a suitable alternative for production of homologous endo-xylanase by SSF, under conditions of selective expression of a single xylanasees_ES
dc.formatAdobe PDFes_ES
dc.language.isoEspañoles_ES
dc.relation.requiresSies_ES
dc.rightsAcceso Abiertoes_ES
dc.subjectBIOLOGÍA Y QUÍMICAes_ES
dc.subjectCIENCIAS DE LA VIDAes_ES
dc.titleProducción de enzimas xilanoliticas por Aspergillus niger GS1, y expresión homóloga de una ß-xilosidasaes_ES
dc.typeTesis de doctoradoes_ES
dc.creator.tidcurpes_ES
dc.contributor.tidcurpes_ES
dc.creator.identificadorAARA811128HCSMYL05es_ES
dc.contributor.identificadorREGC550803HQTGNR01es_ES
dc.contributor.roleDirectores_ES
dc.degree.nameDoctorado en Ciencias de los Alimentoses_ES
dc.degree.departmentFacultad de Químicaes_ES
dc.degree.levelDoctoradoes_ES
Appears in Collections:Doctorado en Ciencias de los Alimentos

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
RI003391.pdf1.41 MBAdobe PDFThumbnail
View/Open


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.