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Título : Diagnóstico molecular de aislados de Mycobacterium spp. provenientes de pacientes sospechosos a tuberculosis
Autor(es): Claudia Angelica Perea Razo
Palabras clave: Tuberculosis
Mycobacterium
AFB stain
zoonosis
BAAR
Área: BIOLOGÍA Y QUÍMICA
Fecha de publicación : oct-2015
Facultad: Facultad de Ciencias Naturales
Programa académico: Maestría en Salud y Producción Animal Sustentable
Resumen: La tuberculosis es una de las enfermedades infecciosas de mayor contagio en el mundo y ha sido la principal causa de muerte debido a un solo agente infeccioso en personas adultas. Mycobacterium tuberculosis es la principal causa de tuberculosis en humanos, pero existenreportes decasos ocasionados por M. bovis.El objetivo de este trabajo fue identificar las infecciones causadas porM. bovis en pacientes humanos sospechosos a la enfermedad mediante el análisis molecular de las muestras. Se analizaron 2736 muestras de esputo mediante la técnica de BAAR(tinción Ziehl-Neelsen de Bacilos Ácido-Alcohol Resistentes)y posteriormente se hizo la siembraen mezclade las muestras seriadas en medios de cultivo Lowenstein-Jensen (M. tuberculosis) y Stonebrink (M. bovis). Se realizó la extracción de ADNde los 21 cultivos positivospara llevar a cabolaPCR tiempo real para la diferenciación entrelas dos especies. Losaislados de M. bovisanalizados en este estudio fueron secuenciados y tipificadosmediantepolimorfismos de un sólo nucleótido(SNPs). En este trabajose analizaron 2736 muestrasde 1154 pacientes,531 mujeres (46%)y 496 hombres (43%). De 127muestras (11%)no se obtuvo informaciónsobre elgénero. Se obtuvo una frecuencia del 1.8% (21) de casos positivos a la enfermedad, 6 mujeres, 7 hombres y 8de génerodesconocido; de los 15 aislados secuenciados, 2 (13%) resultaron M. bovisy 13 (87%) M. tuberculosis, lo que implica una incidencia de 9.5% de M. bovis en pacientes positivos a la enfermedad.Los resultados obtenidos indican que existe una frecuencia considerable de infecciones en humanos causadas por M. bovis, por lo cual resulta importante realizar la diferenciación de especie del complejo M. tuberculosis, que nos permita realizar un diagnóstico acertado y administrar el tratamiento adecuado para el paciente.
Tuberculosis is amongstthe most contagious of infectious diseases in the world and it has been the main cause of death due to a single infectious agent in adults. Mycobacterium tuberculosisis the main cause of tuberculosis in humans, but there have been cases of disease caused by M. bovisas well. The principal objective of this study is to determine the role of M. bovisin human tuberculosisthrough the molecular analysis of isolates obtained from patients suspected of having tuberculosis. Human sputum specimens were examined by direct microscopy and culture was also performedin Lowenstein-Jensen (M. tuberculosis) and Stonebrink (M. bovis) mediums. From the positive cultures, DNA extraction was performed in order to do real time PCR analysis for the identification of species. Furthermore, whole genome sequencing was done for the M. bovis isolatesfor genotypingby single nucleotide polimorfisms (SNPs). There was a total of 2736 specimens from 1154 patients, of which 531 were women (46%), 496 men (43%), and of 127 (11%) it wasn ́t possible to obtain such information. The total frequencyobtained was of 1.8% (21) positive cases of tuberculosis, 6 women, 7 men and 8 had no information. Of the 15 isolate that were sequenced, 2 (13%) were identified as M. bovisand 13(87%) as M. tuberculosis. That is9.5% of the tuberculosis cases were due toM. bovis.These results show how important itisto perform species identification for the appropriate treament.
URI: http://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/1246
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