Descripción:
Las infecciones por virus del dengue son un problema de salud pública importante.
La enfermedad es provocada por cualquiera de los cuatro serotipos virales
(DENV1-4) cuya tipificación es vital para una vigilancia epidemiológica adecuada
que permita implementar acciones encaminadas a prevenir la aparición de casos de
dengue clásico o sus manifestaciones graves. El presente trabajo tiene como
objetivo la identificación de serotipos virales, utilizando la técnica de Ensayos de
Movilidad de Heteroduplex (HMA). Se estudiaron sobrenadantes de cultivos de
virales de los cuatro serotipos y 21 sueros de pacientes con infección confirmada
por dengue. Se extrajeron los de ácidos nucleicos, seguido de amplificación por RTPCR de un fragmento de 164 pb del gen de la cápside. Los amplicones de los 4
serotipos de referencia se analizaron por HMA, y posteriormente se utilizaron para
la determinación del serotipo en las muestras clínicas. Para el HMA se combinaron
los amplicones de cada muestra con los de los 4 virus de referencia, la mezcla se
calentó a 95%C, y enfrió a 4%C. Posteriormente se analizaron por electroforesis en
geles de poliacrilamida al 7.5%. El HMA con los virus de referencia mostró que es
posible utilizar esta técnica para la identificación del serotipo. Con este ensayo se
logró tipificar a 20 muestras del serotipo 1 y una del 3 (solo una muestra no fue
tipificable). Esta técnica es una alternativa atractiva debido a que es económica,
sencilla, rápida para el seguimiento de los virus circulantes del dengue y podría
serlo para otros patógenos