Las plantas son organismos sésiles que están expuestos constantemente a diferentes estímulos ambientales que pueden causar estrés. Como mecanismo de defensa para sobrevivir y continuar su ciclo de vida, estos organismos modifican su metabolismo y pueden aumentar la producción de metabolitos especializados como respuesta. Los eustresores son factores que actúan mimetizando el efecto del estrés ambiental y pueden ser de origen biótico o abiótico. Los elicitores son factores biológicos que aplicados vía foliar estimulan el sistema de defensa de las plantas y pueden incrementar la producción de metabolitos especializados. Stevia rebaudiana Bertoni es una hierba perene, nativa de Paraguay que tiene un poder edulcorante de hasta 300 veces más que la sacarosa, además de propiedades antihipertensivas, anticariogénicas, antiinflamatorias, anticancerígenas, entre otras. Los compuestos responsables de estas propiedades son los glucósidos de esteviol (SGs), los cuales son metabolitos derivados de los terpenos, sintetizados vía 2-C-metil-D-eritrol-4-fosfato (MEP) principalmente en las hojas. El objetivo de esta investigación fue evaluar el efecto de la elicitación controlada con ácido salicílico, quitosán y peróxido de hidrógeno en el contenido de los glucósidos de esteviol, la expresión génica asociada a la biosíntesis de SGs (SrKA13H, SrUGT85C2, SrUGT74G1 y SrUGT76G1) y la morfología en plantas de estevia cultivadas bajo condiciones de invernadero. Los elicitores fueron aplicados semanalmente vía foliar durante cuatro semanas y las muestras se recolectaron 24 horas después de la última elicitación. Se realizaron mediciones morfológicas, las muestras se liofilizaron y procesaron para evaluar el contenido de SGs y la expresión génica asociada. Los resultados mostraron que todos los elicitores evaluados (especialmente el ácido salicílico 0.1 mM) aumentaron el contenido de glucósidos de esteviol, lo que se correlacionó con la inducción de la expresión génica asociada a la biosíntesis de SGs y el aumento del número de hojas en plantas de estevia. Por lo tanto, la elicitación controlada del cultivo de estevia podría utilizarse para mejorar el rendimiento de los glucósidos de esteviol con fines industriales.