El propóleo es un material resinoso elaborado por Apis mellifera L. con un perfil fitoquímico variable y propiedades bioactivas de gran interés para la industria farmacéutica, cosmética y alimentaria. El objetivo de este trabajo fue analizar las especificaciones físicas y químicas de extractos etanólicos de propóleo obtenidos mediante dos metodologías de extracción: agitación constante por 72 h y baño ultrasónico. Las muestras fueron cosechadas en el Apiario-escuela del Campus Amazcala de la Universidad Autónoma de Querétaro, durante el periodo otoño-invierno de los años 2022, 2023 y 2024. Las características físicas (color, aroma, sabor y consistencia) se evaluaron a través de un panel de 30 jueces afectivos no entrenados. En las características químicas se determinó la actividad antioxidante mediante los ensayos DPPH, ABTS y FRAP. La actividad antibacteriana se determinó contra bacterias Gram positivas (Staphylococcus aureus ATCC BAA-976 y Enterococcus faecalis CDBB-B1533) y Gram negativas (Escherichia coli ATCC 8739 y Pseudomonas aeruginosa AT5 0145). Se observó que la evaluación física no presentó variaciones significativas interanuales, validando la estabilidad sensorial del producto almacenado. Químicamente, el método de agitación constante mostró un mayor rendimiento en la extracción de polifenoles totales (88.14±27.67 mg EAG/g) y generó valores significativamente mayores en todos los ensayos de actividad antioxidante. El método de baño ultrasónico potenció la liberación de flavonoides, destacando significativamente la muestra del año 2024 (124.71±3.64 mg ER/g). En las pruebas microbiológicas, únicamente se observó inhibición frente a las cepas bacterianas Gram positivas, independientemente del método de extracción. A partir de estos resultados se demuestra que el método por agitación constante favorece la extracción de polifenoles totales y maximiza el potencial antioxidante, mientras que el baño ultrasónico optimiza la extracción de flavonoides. Se concluye que el propóleo del Apiario-escuela del Campus Amazcala posee potencial bioactivo; y que el método de extracción debe seleccionarse estratégicamente según el objetivo de interés, validando a este propóleo regional como una materia prima de calidad para el desarrollo de productos con propiedades antioxidantes y antibacterianas.