Implementación de marcadores de selección en Trichoderma atroviride

Juana Jazmín Esquivel Méndez

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Campo DC	Valor	Lengua/Idioma
dc.rights.license	http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0	es_ES
dc.contributor	Edgardo Ulises Esquivel Naranjo	es_ES
dc.creator	Juana Jazmín Esquivel Méndez	es_ES
dc.date	2023-05-08	-
dc.date.accessioned	2023-05-04T19:16:48Z	-
dc.date.available	2023-05-04T19:16:48Z	-
dc.date.issued	2023-05-08	-
dc.identifier.uri	https://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/7980	-
dc.description	"Las especies del género Trichoderma son hongos saprofitos de importancia industrial para la producción de enzimas, metabolitos y utilizados ampliamente en la agricultura para el control biológico de hongos fitopatógenos. Trichoderma atroviride tiene su genoma secuenciado y es utilizado como modelo para estudiar su capacidad antagónica, el metabolismo, la morfogénesis y la interacción con plantas. Varias herramientas moleculares han sido establecidas para la manipulación genética de este hongo con el objetivo de estudiar las funciones de sus genes; sin embargo, existen limitados marcadores seleccionables para su transformación genética. En esta investigación se caracterizaron genes que confieren resistencia a nourseotricina, a benomilo y a carboxina. El gen nat1 seleccionable con nourseotrIcina, se clonó en el plásmido pCB1004. Se estableció la técnica de PCR doble unión para realizar una mutación puntual en el gen tub2 de T. atroviride, cambiando una histidina por una tirosina en la posición 6 de la beta-tubulina. También se realizó un cambio puntual de la histidina por una leucina en la posición 243 de la succinato deshidrogenasa (sdh) que confiere resistencia a carboxina, sin embargo, no se incluyó el promotor con el objetivo de que solo las transformantes que integraran el plásmido por recombinación homóloga fueran capaces de crecer en presencia de carboxina; sin embargo, no fue posible obtener transformantes resistentes, indicando que es esencial incluir la región promotora a un marcador seleccionable para su funcionalidad en T. atroviride. La mutación en el gen tub2 confirió resistencia a benomilo, generando transformantes estables por la integraron del ADN por recombinación homóloga. La caracterización fenotípica indica diferente resistencia al benomilo en micelio y en espora, sugiriendo una función específica de desarrollo del gen tub2. El gen nat1 que codifica para la N-acetil transferasa confirió resistencia a nourseotricina, pero las transformantes fueron inestables cuando se crecen sin selección, perdiendo resistencia y el plásmido en la primera generación de esporas. Se utilizó el vector pBC-NTC para experimentos de complementación de mutantes carentes del gen Nik1 que codifica una histidina cinasa y el gen cla4 que codifica una proteína cinasa MAPKKKK, pero no se tuvo éxito. Con el gen sdh con resistencia a carboxina no se logró obtener transformantes de Trichoderma, probablemente por la ausencia del promotor en la construcción. En conclusión, se implementó el marcador seleccionable heterólogo nat1 que funcionó con alta eficiencia de transformación, generando transformantes inestables, y un marcador seleccionable homólogo tub2 con baja eficiencia de transformación, pero generando transformantes estables. Los resultados demuestran el potencial uso de estos marcadores de selección para el análisis funcional de genes en T. atroviride."	es_ES
dc.format	Adobe PDF	es_ES
dc.format.extent	1 recurso en línea (105 páginas)	es_ES
dc.language.iso	spa	es_ES
dc.publisher	Ciencias Naturales	es_ES
dc.relation.requires	No	es_ES
dc.rights	En Embargo	es_ES
dc.subject	Biología y Química	es_ES
dc.subject	Ciencias de la Vida	es_ES
dc.subject	Biología molecular	es_ES
dc.title	Implementación de marcadores de selección en Trichoderma atroviride	es_ES
dc.type	Tesis de licenciatura	es_ES
dc.creator.tid	curp	es_ES
dc.contributor.tid	curp	es_ES
dc.creator.identificador	EUMJ971105MMNSNN05	es_ES
dc.contributor.identificador	EUNE710817HMNSRD15	es_ES
dc.contributor.role	Director	es_ES
dc.degree.name	Licenciatura en Microbiología	es_ES
dc.degree.department	Facultad de Ciencias Naturales	es_ES
dc.degree.level	Licenciatura	es_ES
dc.matricula.creator	227720	es_ES
dc.folio	CNLIN-227720	es_ES
Aparece en:	Licenciatura en Microbiología

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