Title:	Determinación de la estabilidad genética de cepas de Mycobacterium bovis en infecciones seriadas en Cobayos
metadata.dc.creator:	Carlos Olinto Serna González
Keywords:	Estabilidad genética Mycobacterium bovis Infecciones
metadata.dc.date:	Mar-2003
Publisher:	Universidad Autónoma de Querétaro
metadata.dc.degree.department:	Facultad de Ciencias Naturales
metadata.dc.degree.name:	Licenciatura en Medicina Veterinaria y Zootecnia
Description:	El objetivo de este trabajo, fue determinar la estabilidad genética de cepas de M. bovis en infecciones seriadas en cobayos. Una cepa de M. bovis obtenida de una lesión de bovino, fue reactivada en dos cobayos y posteriormente, usada para inocular 3 grupos de 6 cobayos, cada uno en forma seriada: 2 mil de una suspensión de 3 mil de M. bovis en solución salina, fueron inoculados al primer grupo de cobayos por vía peritoneal, aproximadamente a las 5 semanas los cobayos fueron sacrificados para tomar muestras de tejidos con lesiones tuberculosas. Dichas muestras fueron procesadas y cultivadas en medios de Lowenstein-Jensen y Stonebrink para el crecimiento de M. bovis. Los aislamientos obtenidos en el medio de cultivo se cosecharon y suspendieron en solución salina fisiológica, para ser utilizados en la inoculación del segundo grupo de cobayos, y así sucesivamente, hasta inocular los 3 grupos. De un total de 18 cobayos, 14 vivieron hasta el momento del sacrificio, todos presentaron algún tipo de lesión en mayor o menor grado; el órgano con las lesiones más notorias fue el nódulo mesentérico. El periodo de incubación fue diferente para los distintos grupos de cobayos, el del segundo grupo fue más corto que el del primero (40 días), y el del tercero (28 días) menor que el segundo (36 días), lo que indicó que las cepas se fueron haciendo cada vez más patógenas para los cobayos. El aislamiento de M. bovis en los cultivos Lowenstein-Jensen y Stonebrink a partir de lesiones, se logró aproximadamente a los 30 días. De un total de 14 muestras procesadas, se logró extraer ADN genómico de 13. Para determinar los patrones genéticos de los aislados se utilizó la técnica de Spoligotyping. La diferenciación de las cepas se realizó determinando la similitud de bandas, de acuerdo a la presencia o ausencia de alguno de los 43 espaciadores previamente fijados a una membrana de nylon. De un total de 13 muestras se obtuvieron 4 grupos genéticos. Los grupos involucrados aislados de diferentes grupos de cobayos y por conveniencia, éstos fueron nombrados A, B, C y D. El grupo A incluyó a los aislados G2.3, G3.2, G2.2, G2.1, G1 .6 y G1 .2, donde el primer dígito indica el número del grupo, y el segundo el número del cobayo dentro del grupo. Todos estos aislados presentaron idéntico patrón genético. El grupo B incluyó los aislados G1 .4 y G2.4, el grupo C incluyó a los aislados G1 .5, G3.1 y G3.3, y finalmente, el grupo D incluyó a los aislados G1 .3 y G1 .1. Como era de esperarse, la cepa AN5 de M. bovis tuvo mayor similitud genética con los aislados obtenidos de las lesiones; la cepa H37Rv de M. tuberculosis por su parte, mostró la mayor disimilitud genética observada. Los resultados obtenidos mostraron que la diversidad genética de las cepas de M. bovis observadas en las poblaciones animales, no son necesariamente debidas a la mezcla de animales de diferente origen; sin embargo, tampoco puede decirse con certeza que se deba a la presencia de mutaciones no letales que dan origen a nuevas líneas genéticas. Dada la diversidad genética observada en el primer grupo de cobayos, es posible que ésta se deba a la presencia de varias cepas en un mismo tubo de cultivo, o bien, a la presencia de varias cepas en la lesión del tejido afectado. Otro estudio sería necesario para determinar el origen de la diversidad genética de cepas de M. bovis, para entender mejor la epidemiología de la tuberculosis bovina
URI:	https://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/7542
Other Identifiers:	1677 - RI003710.pdf
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