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Título : Síntesis y Evaluación Toxicológica de Nanopartículas de Oro en Células de Cáncer Cervicouterino
Autor(es): Fátima Selene Xocoyotl López
Palabras clave: nanopartículas de oro que contienen quercetina
radiación ultrasónica
células HeLa
Área: INGENIERÍA Y TECNOLOGÍA
Fecha de publicación : 31-oct-2022
Facultad: Facultad de Ingeniería
Programa académico: Ingeniería Biomédica
Resumen: La mayoría de las modalidades actualmente utilizadas para luchar contra el cáncer presentan una importante falta de especificidad dañando indistintamente células cancerosas y sanas. Para superar esta limitación, la nanomedicina resulta ser una buena alternativa para diagnosticar y tratar eficazmente neoplasias malignas localizadas o diseminadas. En este trabajo, se sintetizaron nanopartículas de oro (NPsAu) que en presencia de quercetina y poli (etilenglicol) (PEG-QE-NPsAu) mediante la química verde fue asistida con radiación ultrasónica (RU, 26 kHz), un método simple y verde en solución acuosa. La RU ha demostrado ser útil para generar nanopartículas con un notable control de tamaño y forma. Brevemente, la energía entregada por el fenómeno de cavitación acústica inducido por esta radiación induce reacciones químicas (sonoquímica), bajo condiciones suaves de temperatura y presión. Las PEG-QE-NPsAu se sintetizaron utilizando ácido cloroáurico (HAuCl4 3H2O) como precursor metálico, quercetina (QE) como agente reductor y pro-fármaco natural anticanceroso, y poli (etilenglicol) estándar (PEG) como estabilizador. Se optimizaron las condiciones de síntesis; relaciones molares entre precursores, tiempo, y amplitud del sonotrodo. Los sistemas PEG-QE-NPsAu fueron analizados mediante varias técnicas de UV-Vis, para determinar la posición de la resonancia del plasmón superficial (SPR), Dispersión dinámica de luz (DLS) y potencial zeta (Potencial Z), para evaluar el diámetro hidrodinámico (Hd) y la carga superficial, Microscopía Electrónica de Transmisión (TEM), para analizar el tamaño y la forma del núcleo de la NP, y técnicas de espectroscopía vibracional, para analizar el recubrimiento orgánico. El resultado obtenido por UV-Vis mostró la desaparición de la señal de Au3+ la cual aparece a 310 nm lo cual sugiere una reducción completa del precursor (Au3+) y la formación de las PEG-QE-NPsAu con un SPR localizado alrededor de 528 nm. Mientras que el análisis con DLS y Potencial Z las PEG-QE-NPsAu mostraron un Hd de 142.7 nm (PdI = 0.294), una carga superficial de -14.96 mV al pH fisiológico. Con la espectroscopia MicroRaman y Espectroscopia de Transmisión de Infrarrojo con Transformada de Fourier (FTIR) se identificaron bandas características de QE y PEG, a 528 cm-1 para C-O y el estiramiento del CH2 a 2882 cm-1 en PEG, y aparece una nueva banda para la interacción PEG-QE en 2980 cm-1 que se desplaza ligeramente y disminuye en intensidad a 2079-2971 cm-1, para el caso de PEG-QE-NPsAu, mientras que las señales en 3397 y 3266 cm-1 características de los estiramientos -OH para la QE, se ven drásticamente disminuidos o desaparecen, lo que sugiere una interacción Au-QE y de estás con el PEG. Mientras que con la técnica HRTEM se observó el ensamblado de la PEG-QE-NPsAu con tamaños en un rango de 10 a 25 nm de los núcleos metálicos y una cubierta de 2.5 nm de la parte orgánica (PEG-QE). La toxicidad de las PEG-QE-NPsAu se evaluó utilizando células HeLa (ATCC® CCL-2™) cultivadas en monocapa mediante la realización de un protocolo MTS estándar y liberación de lactato deshidrogenasa (LDH). Las células se incubaron 24 horas con las PEG-QE-NPsAu a concentraciones que variaban de 0.5 a 1000 ug/mL. Los resultados mostraron una dependencia de la dosis con una ligera disminución de la viabilidad. Se están realizando más ensayos in vitro para dilucidar el potencial terapéutico de las PEG-QE-NPsAu propuestos. Por lo tanto, se obtuvieron las QE-NPsAu pegiladas estables las cuales fueron sintetizadas y caracterizadas con éxito, en la perspectiva de generar nuevos conocimientos y proponer alternativas innovadoras basadas en nanotecnología verde para mejorar el rendimiento del tratamiento contra el cáncer.
URI: http://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/3387
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