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Title: Caracterización bioquímica de hialuronidasas presentes en los venenos de tarántulas del género Poecilotheria
metadata.dc.creator: LUIS HUMBERTO RODRIGUEZ RIOS
Keywords: BIOLOGÍA Y QUÍMICA;QUÍMICA
metadata.dc.date: Nov-2016
Description: Los venenos de tarántulas (familia Theraphosidae) están constituidos por mezclas complejas de toxinas que incluyen compuestos de bajo peso molecular, miniproteínas y enzimas con actividad de hialuronidasa. Estas enzimas degradan el ácido hialurónico, un componente importante de la matriz extracelular de varios tejidos, de tal manera que potencian el efecto del veneno al promover la distribución de las toxinas a través de los tejidos de las presas. Los estudios sobre estas enzimas y la búsqueda de nuevas fuentes de estas, se han incrementado debido a su uso potencial como adyuvantes para incrementar la absorción de algunos fármacos. Las tarántulas del género Poecilotheria, constituido por especies arborícolas endémicas de la India, destacan porque sus mordeduras generan síntomas atípicos como dolor severo, vómito y calambres musculares en humanos. En el presente trabajo, se determinó la actividad de hialuronidasa de los venenos de doce especies de tarántulas de diferentes géneros, incluyendo cuatro especies del género Poecilotheria, y se determinaron algunas propiedades bioquímicas de estas enzimas. Los resultados indicaron que el veneno de P. ornata fue el que presentó mayor actividad enzimática (27.56 ± 0.9073 TRU/mg). Mediante análisis de electroforesis y zimografía en una dimensión, se encontró que todos los venenos poseen hialuronidasas con un peso molecular relativo de 38 a 42 kDa. Solamente el veneno de N. chromatus presentó además hialuronidasas de ~60 kDa. Se determinaron las condiciones de pH y temperatura óptimas de la actividad de hialuronidasa de los venenos del género Poecilotheria, encontrándose un rango de pH óptimo de 3 a 5 y una temperatura óptima variable con rangos de 20 a 70 °C, presentado la actividad más estable el veneno de P. rufilata. Además, los resultados obtenidos mediante análisis de electroforesis 2D, zimografía bidimensional y secuenciación parcial por espectrometría de masas demostraron que estos venenos poseen varias isoformas de hialuronidasas con diferentes puntos isoeléctricos (pI), mostrando un rango de pI de 6 a 8. Los hallazgos encontrados en este trabajo demuestran que los venenos de las tarántulas del género Poecilotheria representan una fuente potencial de hialuronidasas que podrían aplicarse en diversos campos de la biotecnología y la medicina.
Tarantula¿s venoms comprise a complex mixture of toxins that includes low molecular weight compounds, miniproteins and enzymes with hyaluronidase activity. Hyaluronidases degradate hyaluronic acid, an important element of extracellular matrix from diverse tissues, by doing so, these enzymes enhance venom¿s effect by promoting the distribution of toxins through prey¿s tissues. Research on regard these enzymes and searching for new sources, has been increasing due to its potential use as coadyuvants to promote absortion of some drugs. Tarantulas from Poecilotheria genus, consisting of arboreal species endemic from India, are characterized by their bite atypic symptomatology which includes severe pain, vomiting and muscle cramps in humans. In this work, hyaluronidase activity from the venoms of 12 species of tarantulas from different genera including four Poecilotheria species have been determined, as well as, some biochemical properties of such enzymes. Results showed that P. ornata presented the highest enzymatic activity (27.56 ± 0.9073 TRU/mg). Through one dimentional electrophoresis and zimography, it was found that all venoms present hyaluronidases with a relative molecular weight of 38 to 42 kDa; solely N. chromatus venom presented an extra hyaluronidase of ~60 kDa. Optimal pH and temperature conditions of hyaluronidase activity assay were determined from the venoms of Poecilotheria genus, which exhibited an optimal pH range from 3 to 5, and optimal temperature from 20 to 70 ºC, being P. rufilata venom the one who showed the most stable activity. Additionally, results obtained through 2D electrophoresis, bidimentional zymography and partial sequencing by mass spectrometry demonstrate that these venoms possess different isoforms of hyaluronidase with different isoelectric points, exhibiting a range of isoelectric point from 6 to 8. The results found in this work demonstrate that tarantula¿s venoms from Poecilotheria genera represent a potential source of hyaluronidase that could be applied in diverse fields of biotechnology and medicine.
URI: http://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/858
Other Identifiers: Poecilotheria
Poecilotheria
Tarantula
Tarántula
Veneno
Venom
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