Clonación de una toxina formadora de poros (PFT) sintetizada por el "coral de fuego" Millepora alcicornis y caracterización de su efecto citolítico

Jesús Eduardo Vega Tamayo

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dc.rights.license	http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0	es_ES
dc.contributor	Ma. Alejandra Rojas Molina	es_ES
dc.creator	Jesús Eduardo Vega Tamayo	es_ES
dc.date	2022-08-26
dc.date.accessioned	2023-06-20T20:23:13Z
dc.date.available	2023-06-20T20:23:13Z
dc.date.issued	2022-08-26
dc.identifier.uri	https://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/8774
dc.description	Millepora alcicornis es un importante organismo constructor de arrecifes en el Caribe Mexicano. Este cnidario es miembro de la familia Milleporidae, la cual incluye a los hidrocorales conocidos comúnmente como “corales de fuego”, debido a que producen lesiones similares a quemaduras. Los agentes causales de dichos efectos son principalmente toxinas de naturaleza proteica sintetizadas para la captura de presas y defensa, entre las que se encuentran algunas toxinas formadoras de poros (PFTs,). Las PFTs tienen un gran potencial para su aplicación en las áreas de la biotecnología, la farmacia y la agricultura. A la fecha, se desconoce la estructura química y el mecanismo de acción de las toxinas producidas por los "corales de fuego", lo cual ha impedido el diseño de terapias adecuadas para tratar la toxicidad ocasionada por estos organismos. En un estudio previo, mediante una estrategia bioinformática, nuestro grupo de trabajo detectó en el transcriptoma de M. alcicornis tres transcritos que codifican para citolisinas y un transcrito que codifica para una PFT. En este contexto, la secuencia codificante para una hidralisina se clonó en el vector pET28b entre los sitios de restricción NcoI y XhoI. Posteriormente, el vector se transformó en bacterias Escherichia coli C41 (DE3) competentes para su expresión. El análisis, mediante SDS-PAGE, del extracto conteniendo las proteínas expresadas por vía recombinante reveló la presencia de una banda a 27 kDa que concuerda con el peso molecular predicho de las hidralisinas. La determinación de la actividad hemolítica reveló que el extracto total que contenía la toxina recombinante provocaba hemólisis en eritrocitos de humano con una UH50 igual a 17.5 ± 1.015 µg/mL. No obstante, las pruebas para la determinación del blanco de unión y estimación del tamaño de poro no mostraron resultados concluyentes debido a la alta complejidad del extracto total. En conclusión, los resultados de este trabajo mostraron que es posible expresar en la cepa de E. coli C41(DE3) la PFT de tipo hidralisina identificada en el transcriptoma de M. alcicornis. Sin embargo, es necesario realizar experimentos adicionales para obtener resultados contundentes, que a la postre, ayuden a proponer a la hidralisina como un prototipo estructural para el desarrollo de herramientas biotecnológicas y/o farmacológicas.	es_ES
dc.format	Adobe PDF	es_ES
dc.language.iso	spa	es_ES
dc.publisher	Química	es_ES
dc.relation.requires	Si	es_ES
dc.rights	Acceso Abierto	es_ES
dc.subject	Biología y Química	es_ES
dc.subject	Química	es_ES
dc.subject	Otras Especialidades Químicas	es_ES
dc.title	Clonación de una toxina formadora de poros (PFT) sintetizada por el "coral de fuego" Millepora alcicornis y caracterización de su efecto citolítico	es_ES
dc.type	Tesis de maestría	es_ES
dc.creator.tid	curp	es_ES
dc.creator.identificador	VETJ970422HGTGMS09	es_ES
dc.contributor.role	Director	es_ES
dc.degree.name	Maestría en Ciencias Químico Biológicas	es_ES
dc.degree.department	Facultad de Química	es_ES
dc.degree.level	Maestría	es_ES