Inmovilización de la enzima urato oxidasa para desarrollo de un Biosensor de Ácido Úrico

Bryan Modesto Landeros Alamilla

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dc.rights.license	http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0	es_ES
dc.contributor	Janet Ledesma García	es_ES
dc.creator	Bryan Modesto Landeros Alamilla	es_ES
dc.date	2023-01-16
dc.date.accessioned	2023-03-17T15:10:36Z
dc.date.available	2023-03-17T15:10:36Z
dc.date.issued	2023-01-16
dc.identifier.uri	https://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/7898
dc.description	El ácido úrico está relacionado de forma directa e indirectamente con diversas enfermedades, principalmente con la hiperuricemia. En la actualidad, existen métodos de cuantificación para la detección de ácido úrico, sin embargo, estos métodos enfrentan complicaciones como la cantidad de muestra que se necesita y el tiempo para la obtención de los resultados. En el presente trabajo se desarrolló y se realizó la optimización de un biosensor enzimático para la detección de ácido úrico. El biosensor se compone de 3 electrodos, el electrodo de trabajo de papel Toray, electrodo de referencia comercial de Ag/AgCl y contraelectrodo de grafito. La enzima urato oxidasa se inmovilizó a través del método cross-linking, usando como agente de atrapamiento glutaraldehído al 5% y diferentes tipos de materiales de carbón nanoestructurados, los cuales permitieron potenciar la detección de ácido úrico. Los materiales nanoestructurados fueron nanotubos de carbón de pared múltiple carboxilados, nanotubos de carbón de pared múltiple sin funcionalizar y nanofibras de carbón, seleccionando las nanofibras debido a los resultados obtenidos de las pruebas electroquímicas, voltamperometrías cíclicas y cronoamperometrías. En segundo lugar, se optimizaron las concentraciones de enzima y de nanofibras de carbón, obteniendo una concentración ideal de enzima de 10 mg mL-1 y de CNF 5 mg mL-1. El límite de detección fue de 0.92 μM, límite de cuantificación de 3.49 μM, la constante de Michaelis Menten de 12.64 μM y un rango lineal de 0-1600 μM. Posteriormente, se realizó la evaluación del electrodo de trabajo con diferentes valores de pH, simulando los valores encontrados en fluidos biológicos como sangre, sudor y orina. Esto con la finalidad de observar el comportamiento del biosensor. Las soluciones fueron: buffer Tris-HCl pH 8.8, buffer de fosfato 7.4, buffer de fosfato 5.7 y buffer de acetato 4.5. Los resultados obtenidos fueron similares, sin embargo, se presentó un menor rango lineal en medios ácidos. Las pruebas de interferentes se realizaron en buffer de fosfato 7.4, esto debido a que las evaluaciones finales se planearon realizar en suero. Los interferentes utilizados fueron: glucosa, ácido ascórbico, urea y ácido láctico, ninguno presentó un porcentaje de interferencia mayor al 10 %. Finalmente, el biosensor fue probado con muestras reales. Se extrajo el suero de sangre de dos voluntarios y se llevó a cabo el análisis de las muestras. La evaluación del voluntario 1 mostró una concentración de ácido úrico en suero de 236 μM, mientras el voluntario 2 mostró una concentración de ácido úrico en suero de 456.69 μM.	es_ES
dc.format	Adobe PDF	es_ES
dc.language.iso	spa	es_ES
dc.publisher	Ingeniería	es_ES
dc.relation.requires	No	es_ES
dc.rights	Acceso Abierto	es_ES
dc.subject	Biología y Química	es_ES
dc.subject	Química	es_ES
dc.subject	Química analítica	es_ES
dc.title	Inmovilización de la enzima urato oxidasa para desarrollo de un Biosensor de Ácido Úrico	es_ES
dc.type	Tesis de licenciatura	es_ES
dc.creator.tid	curp	es_ES
dc.contributor.tid	curp	es_ES
dc.creator.identificador	LAAB981010HDFNLR05	es_ES
dc.contributor.identificador	LEGJ780917MGTDRN05	es_ES
dc.contributor.role	Director	es_ES
dc.degree.name	Ingeniería en Nanotecnología	es_ES
dc.degree.department	Facultad de Ingeniería	es_ES
dc.degree.level	Licenciatura	es_ES