Expresión recombinante de la proteína de cuerpos esféricos 4 (SBP-4) de babesia bigemina

Adolfo Cruz Reséndiz

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dc.rights.license	http://creativecommons.org/licenses/by-nd/4.0	es_ES
dc.contributor	Juan Joel Mosqueda Gualito	es_ES
dc.creator	Adolfo Cruz Reséndiz	es_ES
dc.date	2014-02
dc.date.accessioned	2016-08-22T18:30:25Z
dc.date.available	2016-08-22T18:30:25Z
dc.date.issued	2014-02
dc.identifier	387 - RI000621.pdf	es_ES
dc.identifier.uri	https://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/6317
dc.description	La babesiosis bovina, una enfermedad transmitida de un bovino a otro por garrapatas, representa un importante problema de salud animal y al mismo tiempo un impacto económico debido a la disminución de la producción y la muerte de animales infectados. A la fecha, no existen vacunas seguras contra el parásito que confieran protección a los bovinos vacunados, por lo tanto se deben estudiar las proteínas del parásito involucradas en los mecanismos de invasión o escape del mismo. El objetivo del trabajo fue clonar y expresar de forma recombinante a la proteína de los cuerpos esféricos 4 (SBP4) de B. bigemina. Se diseñaron oligonucleótidos para amplificar el gen sbp4 en marco de lectura abierto (ORF) con un total de 774pb. Posteriormente, se purificó el DNA de B. bigemina cepa Chiapas a partir de garrapatas infectadas. Se realizó la amplificación por PCR del gen. El amplicón generado, se clonó en el vector pENTR¿/D-TOPO®, el cual se usó para transformar células competentes Escherichia coli cepa TOP10. Posteriormente se purificó el DNA bacteriano de las clonas y se incubó con las enzimas de restricción Not I y Asc I para verificar la presencia del inserto, el cual se visualizó mediante electroforesis. De estas clonas se seleccionaron 2 positivas y se secuenciaron para corroborar el ORF. Se procedió a realizar la subclonación del gen en el vector pDEST¿17, el cual se usó para transformar bacterias E. coli cepa BL21-AI¿. Se indujo la expresión de la proteína agregando al medio Larabinosa y se incubaron las bacterias por 3 horas. La identificación de la proteína se realizó por Western Blot utilizando un anticuerpo anti-tag de histidinas en lisados de bacterias transformadas. Se observó una banda de aproximadamente 30 KDa confirmando la expresión de la proteína. Con esta metodología es posible obtener proteínas recombinantes que posteriormente pueden ser evaluadas como vacunas o métodos de diagnóstico contra la babesiosis bovina.	es_ES
dc.format	Adobe PDF	es_ES
dc.language.iso	spa	es_ES
dc.publisher	Universidad Autónoma de Querétaro	es_ES
dc.relation.requires	No	es_ES
dc.rights	Acceso Abierto	es_ES
dc.subject	Babesiosis	es_ES
dc.subject	Clonación	es_ES
dc.subject	Expresión	es_ES
dc.title	Expresión recombinante de la proteína de cuerpos esféricos 4 (SBP-4) de babesia bigemina	es_ES
dc.type	Tesis de licenciatura	es_ES
dc.contributor.role	Director	es_ES
dc.degree.name	Licenciatura en Medicina Veterinaria y Zootecnia	es_ES
dc.degree.department	Facultad de Ciencias Naturales	es_ES
dc.degree.level	Licenciatura	es_ES