La resistencia bacteriana se ha convertido en un reto para las comunidades médicas, ya que la rapidez con que surgen bacterias multiresistentes no es igual a la velocidad con la que surgen nuevos antibióticos. El objetivo de este estudio es conocer la resistencia microbiológica mostrada por las bacterias aisladas en hemocultivos de pacientes pediátricos del Hospital de Especialidades del Niño y la Mujer ¿Dr. Felipe Núñez Lara¿ durante un periodo de 4 años a través de un estudio descriptivo donde se utilizó como fuente de información la bitácora de estudios microbiológicos y la base de datos del sistema Vitek®2 del departamento de Bacteriología. Como resultado se encontraron 4,705 hemocultivos positivos, de los cuales 588 (12.5%) presentaron crecimiento bacteriano. Se incluyeron 551 hemocultivos con reporte de desarrollo bacteriano, 352 (63.8%) fueron bacterias Gram positivas y 199 (36.1%) Gram negativas. Dentro de las Gram positivas prevalecieron los Staphylococcus spp., mientras que los Gram negativos prevalentes fueron enterobacterias seguidas por bacterias no fermentadoras. El 68.6% de los aislamientos se hicieron en el área de Neonatología. La mayor resistencia del Staphylococcus spp. se encontró para oxaciclina (90.8%) y levofloxacino (60.8%); Staphylococcus aureus mostró alta resistencia para oxaciclina (57.1%) y cefazolina (23.8%); la resistencia a rifampicina y vancomicina fue del 4.8%. Enterococcus faecium se mostró altamente resistente a betalactámicos y glicopéptidos; 30% fue resistente a vancomicina. En el grupo de Gram negativos, E. coli sólo se mostró sensible frente a amikacina y nitrofurantoína mientras que Klebsiella spp. y Enterobacter cloacae fueron resistentes a aminoglucósidos. Pseudomonas spp. mostró resistencia del 29.4% a ceftazidima y cefepime; sólo 3.7% fueron resistentes a carbapenémicos. El presente estudio permitió conocer la frecuencia de microorganismos presentes en hemocultivos de nuestro hospital y sus perfiles de resistencia, con lo que podría aplicarse una terapéutica más específica y efectiva así como establecer políticas para el uso y control de antibióticos.