Estandarización de la técnica de fraccionamiento celular para el estudio de BmVDAC en células de intestino de R. microplus a distintos tiempos post repleción

Mario Gahel Montiel González

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dc.rights.license	http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0	es_ES
dc.contributor	Juan Joel Mosqueda Gualito	es_ES
dc.creator	Mario Gahel Montiel González	es_ES
dc.date	2023-02-01
dc.date.accessioned	2023-02-17T19:48:10Z
dc.date.available	2023-02-17T19:48:10Z
dc.date.issued	2023-02-01
dc.identifier.uri	http://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/4405
dc.description	BmVDAC es una proteína de Rhipicephalus microplus que se ha demostrado se sobreexpresa y relocaliza en células de intestino de las garrapatas infectadas con Babesia bigemina a diferentes tiempos post repleción, además en experimentos de vacunación de bovinos infectados y no infectados con el parásito, se evidenció un alto porcentaje de protección fundamentalmente en la fertilidad de las garrapatas colectadas de los animales vacunados, sin embargo no se conoce la función que podría estar jugando esta proteína durante la infección de B. bigemina. Uno de los aspectos importantes para profundizar y conocer la función de cualquier proteína es estudiar donde se localiza, en humanos VDAC que es una proteína mitocondrial también se ha localizado en la membrana plasmática. El objetivo del presente trabajo fue la estandarización de la técnica de fraccionamiento celular a partir de intestinos de R. microplus, para el estudio de la localización de la proteína BmVDAC durante la infección con B. bigemina a distintos tiempos post repleción. Las condiciones de la estandarización de la extracción de fracciones fue la ruptura celular, lavados entre la extracción de fracciones y anticuerpos específicos como marcadores de fracciones, fueron establecidas usando extractos de membrana de garrapatas colectadas en el campo. Una vez establecidas las condiciones, se colectaron garrapatas de bovinos infectados y no infectados con B. bigemina y se extrajeron los intestinos a las 0, 24 y 72 horas post repleción. Una parte de los intestinos se usó para realizar un cultivo primario para la inmunolocalización por microscopía confocal y a la otra parte se les hizo la extracción y análisis de fracciones celulares. Las diferentes fracciones fueron analizadas en geles SDS-PAGE al 10%, transferidas a membranas de nitrocelulosa y reveladas con anticuerpos anti-BmVDAC y anti-Bm86 como marcador de membrana. Los resultados de esta investigación sugieren que la proteína BmVDAC se encuentra únicamente en la fracción membranal, aunque una de las limitaciones del fraccionamiento realizado es que la fracción membranal incluye tanto la membrana citoplasmática como mitocondrial, por ello es necesario determinar si la proteína BmVDAC se relocaliza a la membrana citoplasmática en consecuencia de la infección por B. bigemina con ensayos de microscopía confocal. Este proyecto se realizó durante la pandemia de Covid- 19, lo que complico e hizo imposible realizar la inmunolocalización de BmVDAC mediante microscopia por la limitación en disposición de las instalaciones y los	es_ES
dc.format	Adobe PDF	es_ES
dc.language.iso	spa	es_ES
dc.publisher	Ciencias Naturales	es_ES
dc.relation.requires	No	es_ES
dc.rights	Acceso Abierto	es_ES
dc.subject	Biología y Química	es_ES
dc.subject	Ciencias Agrarias	es_ES
dc.title	Estandarización de la técnica de fraccionamiento celular para el estudio de BmVDAC en células de intestino de R. microplus a distintos tiempos post repleción	es_ES
dc.type	Tesis de licenciatura	es_ES
dc.creator.tid	curp	es_ES
dc.contributor.tid	curp	es_ES
dc.creator.identificador	MOGM960419HDFNNR06	es_ES
dc.contributor.identificador	MOGJ690513HQTSLN02	es_ES
dc.contributor.role	Director	es_ES
dc.degree.name	Licenciatura en Microbiología	es_ES
dc.degree.department	Facultad de Ciencias Naturales	es_ES
dc.degree.level	Licenciatura	es_ES