El acelerado incremento en el surgimiento y diseminación de cepas bacterianas multirresistentes a los antibióticos representa uno de los riesgos globales más apremiantes que amenazan a la humanidad, por ello, se han explorado diversas alternativas para para desarrollar nuevos fármacos, entre ellos los péptidos antimicrobianos, son moléculas clave en la respuesta inmune innata presentes en diversas especies de animales y plantas. Recientemente se ha considerado la caracterización y aislamiento de péptidos antimicrobianos sintetizados por organismos invertebrados. En el presente trabajo se evaluó la actividad antimicrobiana del veneno de la tarántula Goliat de Borgoña (Theraphosa stirmi) y cuatro fracciones obtenidas del veneno separadas por cromatografía de fase reversa, sobre los microorganismos S. saprophyticus (ATCC baa-750), S. tiphymurium (ATCC 14028), C. albicans (ATCC 276), S. cerevisiae (ATCC MYA-198), L. monocytogenes (ATCC 7644), E. coli (ATCC 25922) utilizando ensayos de microdilución en placa, pruebas de difusión en disco y ensayos de vertido en placa. El veneno y las fracciones obtenidas no demostraron tener actividad inhibitoria antibiótica en las pruebas de inhibición en disco. No se encontró actividad inhibitoria significativa (P ≤ 0,05) en las pruebas de dilución en caldo ni en las de extensión en placa. Mediante un análisis filogenético, se compararon los péptidos antimicrobianos reportados de otras especies de arácnidos y se determinó que los péptidos antimicrobianos previamente reportados, obtenidos a partir del veneno de terafósidos, presentan una divergencia mayor comparada con el género Theraphosa que comparado entre los dos géneros de terafósidos con péptidos antimicrobianos.