Patrón de expresión y evaluación de la función de los genes mctp del pez cebra Danio rerio, que codifican para proteínas transmembranales con múltiples dominios C2

Angeles Edith Espino Saldaña

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dc.rights.license	http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0	es_ES
dc.contributor	Fausto Arellano Carbajal	es_ES
dc.creator	Angeles Edith Espino Saldaña	es_ES
dc.date	2021-04-02
dc.date.accessioned	2020-03-04T17:58:58Z
dc.date.available	2020-03-04T17:58:58Z
dc.date.issued	2021-04-02
dc.identifier.uri	http://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/2120
dc.description	Las proteínas MCTP, llamadas así por su siglas en inglés “Multiple C2 and transmembrane domain containing protein” presentan tres dominios C2 y dos pases transmembranales que unen Ca2+ en ausencia de fosfolípidos, y esto hace que sus propiedades sean únicas; sin embargo, su papel funcional no está bien descrito. En vertebrados, MCTP se expresa principalmente en cerebro, corazón y músculo esquelético, aunque también en hígado, riñón, testículo y otros órganos. A nivel subcelular, en motoneuronas de Drosophila melanogaster, se ha reportado que se localiza en retículo endoplásmico; además, se ha detectado en endosomas y en vesículas secretorias de neuronas de rata en cultivo primario. A nivel funcional, también en D. melanogaster, se encontró que la deleción del gen Mctp afecta la estabilidad homeostática de la neurotransmisión, sugiriendo que la proteína MCTP funciona como un sensor de Ca2+. El pez cebra (Danio rerio) es un excelente modelo biológico para llevar a cabo estudios de biología molecular, desarrollo y función del sistema nervioso en vertebrados. Ofrece diversas ventajas y es relativamente fácil de manipularlo genéticamente utilizando sistemas tales como el CRISPR/Cas9. En este trabajo, determinamos el patrón de expresión de los genes mctp del pez cebra por RT-PCR, así como su localización espaciotemporal en embriones en varias etapas del desarrollo utilizando hibridación in situ. Clonamos y secuenciamos los cDNAs de los genes mctp, y finalmente evaluamos los efectos provocados por la disrupción del gen mctp2b utilizando el sistema CRISPR/Cas9. Determinamos que en el genoma del pez cebra se encuentran cuatro genes mctp: mctp1a, mctp1b, mctp2a y mctp2b. Los cuatro genes se expresan desde las primeras etapas del desarrollo, así como en todos los tejido analizados en pez adulto, aunque presentan un patrón de expresión diferencial, siendo mctp2b el más abundante. Además, encontramos una alta frecuencia de cambios de nucleótido, y también que tres de los genes presentan eventos de empalme alternativo. Finalmente, hemos mostrado que la disrupción del gen mctp2b afecta el desarrollo normal del embrión, esto sugiere que hay una importante participación funcional durante las primeras etapas del desarrollo.	es_ES
dc.format	Adobe PDF	es_ES
dc.language.iso	Español	es_ES
dc.relation.requires	Si	es_ES
dc.rights	En Embargo	es_ES
dc.subject	mctp	es_ES
dc.subject	pez cebra	es_ES
dc.subject	CRISPR	es_ES
dc.subject	Dominios C2	es_ES
dc.subject.classification	BIOLOGÍA Y QUÍMICA	es_ES
dc.title	Patrón de expresión y evaluación de la función de los genes mctp del pez cebra Danio rerio, que codifican para proteínas transmembranales con múltiples dominios C2	es_ES
dc.type	Tesis de doctorado	es_ES
dc.creator.tid	Clave CV CONACyT	es_ES
dc.contributor.tid	curp	es_ES
dc.creator.identificador	41758	es_ES
dc.contributor.identificador	AECF740209HSPRRS08	es_ES
dc.contributor.role	Director	es_ES
dc.degree.name	Doctorado en Ciencias Biológicas	es_ES
dc.degree.department	Facultad de Ciencias Naturales	es_ES
dc.degree.level	Doctorado	es_ES