Identificación y evaluación de epítopos B conservados en antígenos de Rhipicephalus sanguineus

Gilberto Reyes De Luna

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dc.rights.license	http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0	es_ES
dc.contributor	Juan Joel Mosqueda Gualito	es_ES
dc.creator	Gilberto Reyes De Luna	es_ES
dc.date	2020-01-07
dc.date.accessioned	2020-01-17T19:44:59Z
dc.date.available	2020-01-17T19:44:59Z
dc.date.issued	2020-01-07
dc.identifier.uri	http://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/1905
dc.description	La garrapata café del perro Rhipicephalus sanguineus (Latreille, 1806) es probablemente la especie de garrapata más ampliamente distribuida en el mundo, su estrecha relación con perros domésticos ha facilitado su propagación a las regiones más cálidas del mundo, así como contacto con el ser humano. Debido a la resistencia a garrapaticidas, impacto al medio ambiente y salud pública, es requerido una nueva alternativa sustentable para el control de R. sanguineus. En este trabajo se identificaron epítopos B coservados y expuestos en las proteínas Rs86, RsSubolesina y RsVDAC. Se obtuvó la secuencia predicha de las proteínas del banco de genes. Posteriormente se realizó un alineamiento múltiple para cada proteína para identificar secuencias conservadas. Adicionalmente se realizó un análisis bioinformático para predecir: Presencia de péptido señal, estructuras secundarias, regiones transmembranales y finalmente un análisis bioinformático de antigenicidad y predicción de epítopos B en la región extracelular de las proteínas. Se seleccionaron de 2 a 4 péptidos conteniendo epítopos B conservados de cada proteína y se sintetizaron químicamente en forma de MAP´s 8 (Multiple Antigen Peptide 8). Este estudio evaluó una mezcla de péptidos sintéticos con características de epítopos B conservados de tres proteínas recombinantes, Rs86, RsSubolesina y RsVDAC como antígenos en vacuna contra R. sanguineus. Se utilizaron 8 conejos de la raza Nueva Zelanda divididos en 2 grupos; el grupo testigo recibió PBS y adyuvante, el grupo tratamiento recibió PBS, adyuvante y una mezcla con 100 μg de cada péptido elegido. Todos los animales fueron inmunizados los días 0, 21, 36 y 121. Se tomaron muestras de sangre antes de cada inmunización y al término del experimento. Después de la cuarta inmunización se determinó la producción de anticuerpos contra las tres proteínas usando la técnica de ELISA indirecta, utilizando la dilución 1:500 los resultados se evaluaron por medio de una prueba de ANOVA con una significancia del 95%. Posteriormente los conejos de los dos grupos fueron infestados con larvas de R. sanguineus. El porcentaje de reducción de larvas del grupo tratamiento fue del 10.86% comparado con el grupo control. Se logró amplificar el gen parcial de RsVDAC de 4 aislados mexicanos correspondientes a los estados de Guerrero, Yucatan, Baja California y Morelos, teniendo una identidad mayor del 98% entre las secuencias. Se pudo comprobar que al menos uno de los tres péptidos elegidos de RsVDAC se encuentra en una región conservada con características de Péptido B. Como objetivo adicional el presente estudio se inició para proporcionar nueva información sobre la filogeografía de R. sanguineus en regiones de México, la metodología, resultados y conclusiones del objetivo se muestran en el apartado de anexos de esta tesis.	es_ES
dc.format	Adobe PDF	es_ES
dc.language.iso	spa	es_ES
dc.relation.requires	Si	es_ES
dc.rights	Acceso Abierto	es_ES
dc.subject	R. sanguineus	es_ES
dc.subject	Epítopo	es_ES
dc.subject	Candidato vacunal	es_ES
dc.subject.classification	CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA	es_ES
dc.title	Identificación y evaluación de epítopos B conservados en antígenos de Rhipicephalus sanguineus	es_ES
dc.type	Tesis de maestría	es_ES
dc.creator.tid	curp	es_ES
dc.contributor.tid	curp	es_ES
dc.creator.identificador	RELG890913HDFYNL00	es_ES
dc.contributor.identificador	MOGJ690513HQTSLN02	es_ES
dc.contributor.role	Director	es_ES
dc.degree.name	Maestría en Salud y Producción Animal Sustentable	es_ES
dc.degree.department	Facultad de Ciencias Naturales	es_ES
dc.degree.level	Maestría	es_ES