Los sistemas de cultivo in vitro, en particular los derivados de tejidos de vectores, desempeñan un papelinvaluable e irreemplazable, ya que permiten conocer la biología básica del vector, así como la delos patógenos transmitidos por estos vectoresy larelaciónvector-patógeno. El potencial de las aplicaciones de laslíneas celulares de vectores, por ejemplo líneas celulares de garrapatas, nunca ha sido más amplio.La gama demicroorganismosque pueden propagarse en líneas celulares de garrapata se ha ampliado e incluye varios patógenos procariotas y eucariotasde importanciaveterinariay de salud públicaen todo el mundo.El objetivo de este trabajo fue implementar un cultivo de células embrionarias de garrapatas Rhipicephalus microplus. Para el presente estudiose recolectaron hembras repletas de Rhipicephalusmicroplus de un bovino infestado en el rancho de la Facultad de Medicina Veterinaria Campus Amazcala, se lavaron, desinfectaron e incubaron a 28° C, dos días después las hembras comenzaron a ovopositar, se recolectaron los huevos, se preparó un medio de cultivo compuesto por unamezcla de medio MEM Hanks-LAC, medioL-15Leibowitzasí como Pen/Strepto/Anfotericina B, Caldo Triptosa Fosfato y Suero Fetal Bovino inactivado. Se realizó una maceración mecánica y posteriormente se filtró la suspensión de células después de centrifugar a 200 g se resuspendió el pellet y agrego medio completo nuevo. La suspensión celular se sembró en placas y se mantuvo en una incubadora a 28°C en cámara húmeda. Después de tres semanas de no cambiar el medio y de monitorear su crecimiento, las células fueron observadas al microscopio invertido, la morfología celular fue variada sugiriendo diferentes tipos celulares, entre las que se encuentran células pequeñas redondas, células grandes redondasy agregados célulares. A la cuarta semana estas células se fueron multiplicando y seobservaron agregados celulares en varias puntos localizados, también se observaroncélulas con morfología similar a fibroblastos. El cultivo se mantuvoen condiciones óptimasdurante cinco semanas con cambios de medio cada xxx tiempo
The in vitroculture systems, particularly the ones based on the use of tissues from arthropod vectors, play an invaluable and irreplaceable role, they let us understand the basic biology of a vector, approach the study of the arthropod transmitted pathogens and even to study the vector-pathogen interactions. The use of vector cellular lines, particularly the ones from ticks, has never had this potential. The diversity of microorganisms of veterinary and public health importance that can be spread in tick cellular lines include prokaryotes and eukaryotes from all over the world. The aim of this study was to develop a cellular line based on the use of embryonic tick-cells from Rhipicephalus microplus. We collected adult replete female ticks Rhipicephalus microplus from an artificially infested bovine in the Veterinary Medicine Faculty, campus Amazcala. The ticks were washed, disinfected and incubated at 28 °C. After two days when the tick oviposition began, the eggs were harvested. A culture medium composed of MEM Hanks-LAC, L-15Leibowitzmedium and Pen/Strepto/Anfotericine B, Triptose phosphatum broth and inactivated fetal bovine serum was used. Mechanic maceration was performed and maceration was filtered. After three weeks without changing the medium and to monitor their growth, cells were observed under inverted microscope , the cell morphology was varied suggesting different cell types, including small round cell , large cell panel and cell clusters are. In the fourth week were multiplying these cells and cell aggregates were observed several points located, fibroblast-like cells were also observed morphology . The culture was maintained under optimal conditions for five weeks with medium changes every week.
