Las infecciones causadas por bacterias resistentes a antibióticos (BRA) representan un grave problema de salud pública a nivel mundial. El uso inadecuado de antibióticos en el sector salud y la industria agropecuaria son los principales factores asociados al aumento de BRA en humanos, animales y ambiente. Por tal motivo, es fundamental realizar estudios epidemiológicos desde el contexto de Una Salud para identificar la diversidad y principales fuentes de BRA. Basado en esta premisa, el presente estudio tuvo como objetivo principal desarrollar y validar una estrategia microbiológica cultivo- dependiente e -independiente para la identificación de Enterobacterales resistentes a antibióticos de importancia crítica (ERIC) en entornos de producción animal. Para este fin se realizaron 10 muestreos, divididos en 3 de carne y 7 de camas de pollo, obteniendo un total de 170 aislamientos resistentes a antibióticos de importancia crítica. Las tasas de prevalencia de resistencia a antibióticos y porcentajes de resistencia a antibióticos fueron del 85%, 81% y 43% y del 82%, 79% y 59% para aislamientos recuperados en medios de cultivo suplementados con Cefotaxima, Ciprofloxacino y Meropenem; respectivamente. Estas tasas ratifican la necesidad de mantener una vigilancia estrecha en sobre los ERIC debido a su potencias infectivo y las dificultades que podrían agregar al manejo de infecciones. La estrategia microbiológica desarrollada en el presente estudio podrá implementarse en muestras clínicas provenientes de humanos, animales en producción y ambientales para llevar a cabo una vigilancia epidemiológica de ERIC y con esto generar marcos de referencia para establecer campañas de vigilancia y control de estos potenciales patógenos.