Resumen En México la piroplasmosis equina es una enfermedad de reporte obligatorio y es causada principalmente por Babesia caballi y Theileria equi . La inespecificidad de los signos clínicos en animales enfermos dificulta el diagnóstico, además de que el diagnóstico de laboratorio es complicado debido a las bajas parasitemias en animales persistentemente infectados. Las pruebas con alta sensibilidad diagnóstica son pruebas moleculares costosas y de difícil acceso en campo. Debido a las restricciones para la exportación de caballos vivos a otros países, y a que México es el segundo importador de carne de caballo en el mundo solo detrás de China, es importante investigar el ciclo de vida de estos parásitos para conocer las proteínas implicadas en los procesos de invasión al eritrocito y su reproducción sexual en el vector. Lo anterior con la finalidad de buscar dianas moleculares que permitan el desarrollo de una vacuna y de pruebas diagnósticas para coadyuvar al control y erradicación de la piroplasmosis equina en México. En este proyecto se recolectaron muestras de sangre de equinos de campo expuestos a garrapatas y se les purificó ADN, para posteriorente detectar la presencia de B. caballi y T. equi por medio de nPCR . Paralelamente, se realizó una esplenectomía a un caballo. Una vez identificados los equinos de campo infectados se les extrajo sangre completa y se obtuvo el paquete de eritrocitos parasitados. Posteriormente, con los eritrocitos infectados y lavados se infectó de manera experimental en condiciones controladas al caballo esplenectomizado y se monitorearon sus constantes fisiológicas diariamente. Una vez confirmada la infección experimental por medio de frotis sanguíneos teñidos con Giemsa se obtuvieron muestras de sangre para iniciar cultivo in vitro de B. caballi y T. equi. El tener un cultivo in vitro de estos parásitos abre la oportunidad para iniciar investigaciones que permitan entender mejor el ciclo de vida, generar información para candidatos vacunales y desarrollar pruebas diagnósticas contra la piroplasmosis equina.