Producción y estudios de caracterización  de la proteína recombinante humana Lactoferrina

Beatriz Liliana Álvarez Mayorga

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dc.rights.license	http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0	es_ES
dc.contributor	Jorge Luis Rosado Loría	es_ES
dc.contributor	Sergio de Jesús Romero Gómez	es_ES
dc.contributor	Angelina Rodríguez Torres	es_ES
dc.contributor	Carlos Regalado González	es_ES
dc.contributor	José Antonio Cervantes Chávez	es_ES
dc.creator	Beatriz Liliana Álvarez Mayorga	es_ES
dc.date.accessioned	2024-05-02T15:23:37Z
dc.date.available	2024-05-02T15:23:37Z
dc.date.issued	2024-03-21
dc.identifier.uri	https://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/10432
dc.description	Proteínas como la lactoferrina (LF) presente en la leche materna, es una de las proteínas que proporcionan una variedad de ventajas fisiológicas claves para los infantes y que han tomado interés para su producción recombinante. Muchas son las proteínas recombinantes que se pueden producir por medio de la biotecnología en microorganismos, en plantas y en la leche de ganado bovino transgénico. La producción de proteínas debe ser mejorada de sus fuentes nativas o buscar otras nuevas junto con el desarrollo de sistemas de expresión de proteínas eficientes y el avance de los protocolos de extracción de proteínas. En este estudio se produjo la proteína recombinante LF sérica humana en el sistema eucariótico de Pichia pastoris (renombrada como Komagataella phaffii), utilizando la cepa de levadura transformada con un plásmido previamente caracterizado para la expresión de la hLF, se indujo su producción en un medio de cultivo selectivo, obteniéndose un rendimiento de 0.186mg/mL de proteína excretada al medio. La proteína obtenida, se caracterizó mediante SDS-PAGE, se purificó a partir del medio de cultivo mediante cromatografía de afinidad y se determinaron parámetros termodinámicos mediante espectroscopía de dicroísmo circular (DC). Los espectros obtenidos por DC muestran que a pH alcalino la estructura secundaria de la LF nativa, así como la recombinante, cambia a una estructura desplegada, a pH ácido ambas proteínas precipitan. Mediante la respuesta de DC a diferentes pH y mediante la determinación de parámetros termodinámicos, fue posible proponer que en la producción de LF humana recombinante la forma apo de la proteína podría haberse favorecido en comparación con la LF de origen humano. Para demostrar si una LF recombinante y una LF nativa son comparables en funcionalidad para usarse en productos alimenticios, se deben realizar algunos estudios de seguridad. Sin embargo, el DC puede utilizarse como primera herramienta de inspección en la producción de proteínas recombinantes.	es_ES
dc.format	pdf	es_ES
dc.format.extent	1 recurso en línea (88 páginas)	es_ES
dc.format.medium	computadora	es_ES
dc.language.iso	spa	es_ES
dc.publisher	Universidad Autónoma de Querétaro	es_ES
dc.relation.requires	Si	es_ES
dc.rights	openAccess	es_ES
dc.subject	dicroísmo circular	es_ES
dc.subject	proteínas recombinantes	es_ES
dc.subject	lactoferrina	es_ES
dc.subject	Komagataella phaffii	es_ES
dc.subject.classification	BIOLOGÍA Y QUÍMICA	es_ES
dc.title	Producción y estudios de caracterización de la proteína recombinante humana Lactoferrina	es_ES
dc.type	Tesis de doctorado	es_ES
dc.creator.tid	ORCID	es_ES
dc.contributor.tid	ORCID	es_ES
dc.creator.identificador	0000-0002-9520-2187	es_ES
dc.contributor.identificador	0000-0002-5999-1078	es_ES
dc.contributor.role	Director	es_ES
dc.contributor.role	Asesor	es_ES
dc.contributor.role	Asesor	es_ES
dc.contributor.role	Asesor	es_ES
dc.contributor.role	Asesor	es_ES
dc.degree.name	Doctorado en Ciencias Biológicas	es_ES
dc.degree.department	Facultad de Ciencias Naturales	es_ES
dc.degree.level	Doctorado	es_ES
dc.format.support	recurso en línea	es_ES
dc.matricula.creator	50591	es_ES
dc.folio	CNDCC-50591	es_ES