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Título : Generación de un andamiaje tridimensional de matriz extracelular hepática mediante la técnica de decelularización en ratas Wistar
Autor(es): Nelly Angélica Morales Guerrero
Palabras clave: Medicina y Ciencias de la Salud
Ciencias Médicas
Otras Especialidades Médicas
Fecha de publicación : 14-dic-2018
Editorial : Universidad Autónoma de Querétaro
Facultad: Facultad de Medicina
Programa académico: Maestría en Ciencias en Neurometabolismo
Resumen: Introducción. El hígado es el tercer órgano más trasplantado en el mundo, incluyendo México. En nuestro medio, la falla hepática terminal es provocada principalmente por la hepatitis, el hígado graso no alcohólico y el alcoholismo, los cuales conducen a la cirrosis, caracterizada por la pérdida de la anatomía hepática y vascular, con procesos difusos de necrosis, regeneración y fibrosis nodular. A la fecha, la única opción ante un estadío final de la enfermedad es el trasplante, sin embargo, el panorama de la donación de órganos sigue siendo desalentador. Esto ha provocado la búsqueda de nuevas alternativas para prolongar la vida de estos pacientes. Actualmente, la ingeniería tisular desarrolla novedosas técnicas de descelularización/recelularización que faciliten la generación de órganos funcionales basadas en la obtención de la matriz extracelular (MEC). Esta MEC, el andamiaje tridimensional aislado que sostiene las estirpes celulares, es capaz de permitir la aceptación, diferenciación, proliferación y migración de células nuevas, abriendo la posibilidad de ser repoblada, lo que potencialmente podría generar órganos funcionales. Objetivo: Obtener una MEC hepática de rata Wistar descelularizada mediante perfusión y evaluar sus componentes. Material y métodos: Estudio experimental, en ratas Wistar macho, con peso de 300 gr. Se realizó la extracción del hígado, previa exanguinación, para ser congelado a -80°C. Posteriormente, fueron sometidos al proceso de descelularización vía perfusión portal con una serie de detergentes con Tritón X-100 y SDS. Al finalizar el proceso, se obtuvo una MEC que fue procesada para determinar el contenido celular residual y la preservación de los componentes de la MEC, mediante tinción con hematoxilina y eosina, tricrómico de Masson, ioduro de propidio y calcofluor-blanco y la inmunotinción con isolectina IB4. Resultados. Se obtuvo una MEC semitransparente, con una remoción de aproximadamente del 96% de los componentes celulares y nucleares hepáticos. Se comprobó la presencia de colágeno y proteoglicanos en la MEC descelularizada, con una estructura tridimensional preservada. Conclusiones. El proceso de descelularización hepática desarrollado en este proyecto incluyó etapas de congelamiento y uso secuencial de los detergentes tritón X-100 y SDS, lo que nos permitió obtener una MEC con un alto nivel de remoción celular y preservación de la arquitectura de sus componentes de colágeno y proteoglicanos. Esta MEC obtenida nos permitirá iniciar los ensayos con técnicas de recelularización de estirpes celulares hepáticas.
URI: https://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/10220
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