Título :	Obtención de la enzima lactato oxidasa y su aplicación en un biosensor nanofluídico autoalimentado
Autor:	Jassihel Ordaz Núñez
Palabras clave :	Ingeniería y Tecnología Ciencias Tecnológicas Ingeniería y tecnología químicas
Fecha de publicación :	1-jun-2023
Editorial :	Facultad de Ingeniería
Facultad:	Facultad de Ingeniería
Prográma académico:	Maestría en Ciencias (Nanotecnología)
Resumen:	Los dispositivos microfluídicos permiten trabajar con volúmenes pequeños, en condiciones de reacción controladas, son accesibles y transportables. Pueden ser utilizados en conjunto con algunas moléculas orgánicas permitiendo desarrollar sistemas que generen energía o ayuden en la detección de algún analito; entre estas moléculas orgánicas destacan las enzimas como catalizadores biológicos. El objetivo de este estudio fue proponer una estrategia metodológica que permita obtener un dispositivo nanofluídico autoalimentado utilizando a la enzima lactato oxidasa. Se realizó un análisis bioinformático para seleccionar el gen de la bacteria que codifica para lactato oxidasa; posteriormente se propuso la obtención de la enzima mediante clonación utilizando la técnica Gateway tomando como bacterias fuente a Enterococcus faecium y a Aerococcus viridans para su expresión en E. coli BL21(DE). Se planteó realizar la purificación mediante columnas de centrifugación y la caracterización utilizando la reacción acoplada de peroxidasa de rábano con ABTS. El desempeño de la matriz de Porfirina/GSH-CdTeQ se evaluó mediante espectroscopía de impedancia electroquímica al presentar un aumento en la resistencia del 450% respecto a la matriz sin enzima inmovilizada. La actividad catalítica del bioelectrodo fue evaluada a través de voltamperometrías cíclicas (VC) para determinar si la inmovilización permitía desarrollar actividad, las condiciones bajo las se llevaron a cabo los experimentos fueron sin agitación, utilizando un contraelectrodo de Ag/AgCl y mediante adiciones sucesivas de lactato y se encontró actividad catalítica hasta la concentración 10 mM de lactato, esto nos permite inferir que la proteína propuesta también podrá utilizar el mismo soporte para su inmovilización.
URI :	https://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/8445
Aparece en las colecciones:	Maestría en Ciencias (Nanotecnología)

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