Title:	Purificación y marcaje con Quantum dots de una lectina bioactiva de frijol Tépari (Phaseolus acutifolius)
metadata.dc.creator:	Ricardo Cervantes Jimenez
Keywords:	BIOLOGÍA Y QUÍMICA CIENCIAS MÉDICAS BIOQUÍMICA
Issue Date:	5-Oct-2020
metadata.dc.degree.department:	Facultad de Ciencias Naturales
metadata.dc.degree.name:	Doctorado en Ciencias Biológicas
Description:	Las lectinas son proteínas bioactivas con la capacidad de reconocer los carbohi-dratos de la membrana celular de manera específica. Diversas lectinas de plantas han demostrado potencial diagnóstico y terapéutico contra cáncer, y su citotoxici-dad contra las células transformadas está mediada por la inducción de apoptosis. Trabajos anteriores han determinado la actividad citotóxica de una fracción de lectina de frijol Tépari (Phaseolus acutifolius) (TBLF) por sus siglas en inglés y su efecto antitumoral sobre el cáncer de colon. En este trabajo, un grupo de lectinas de frijol Tépari se purificó por cromatografía de exclusión molecular e intercambio iónico. Dos picos con aglutinación presentaron actividad aglutinante, la lectina más limpia observada por SDS PAGE se nombró (TBL‐IE2) por sus siglas en in-glés, dicha proteína mostró una única banda de proteínas en electroforesis en dos dimensiones, TBL‐IE2, esta proteína se acopló Quantum Dot (QD) por la téc-nica de microfluídica, denominando al complejo (TBL‐IE2-QD) por sus siglas en inglés. El método por microfluídica permitió la formación de complejos homogé-neos, cuya visualización se logró usando microscopía Multifotón y Microscopía Electrónica de Transmisión (MET) la fluorescencia de los QD y del complejo TBL‐IE2-QD presentó una diferencia de 5 nm en la longitud de onda de emisión. El tamaño de partícula del complejo TBL‐IE2-QD fue de 380 nm, mientras que el po-tencial zeta disminuyó en relación a la proteína sin etiquetar con un promedio de (-18,51 mV), lo que implica la unión de QD a la proteína, la citotoxicidad de TBL‐IE2 y TBL‐IE2‐QD se analizó contra células HT‐29 células de cáncer de colon, donde se determinó que muestran diferencias entre ellas con una (p ≤ 0.05). La CL50 fue de 1 X10−3 y 1.7 X 10−3 mg/mL, respectivamente. La técnica microfluídica permitió un acoplamiento homogéneo entre el QD y la lectina, mejorando sustan-cialmente el proceso de etiquetado en relación a otras técnicas de marcaje. Los estudios futuros se centrarán en el uso del complejo TBL‐IE2‐QD como un poten-cial método de diagnóstico para el reconocimiento de tejidos tumorales, que per-mitirá además dar seguimiento directo a la interacción de la lectina con el tejido blanco.
URI:	http://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/2360
Other Identifiers:	Cáncer Proteína Quantum Dot Marcaje de proteínas Microfluídica
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