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Title: Efectos neuroregenerativos asociados a la hormona de crecimiento en neuroretina de pollo
metadata.dc.creator: David Epardo Argaiz
Keywords: BIOLOGÍA Y QUÍMICA;CIENCIAS MÉDICAS;BIOLOGÍA MOLECULAR
metadata.dc.date: 19-Dec-2020
Description: La neuroregeneración es un proceso conservado en vertebrados inferiores pero parcial o ausente en vertebrados superiores. Específicamente la retina de las aves después de un daño por excitotoxicidad, se regenera de manera parcial y reintegra un bajo porcenaje células neurales originadas a partir de las células gliales de Müller a través del proceso de transdiferenciación. Factores como FGF2, IGF-1, Sox2, Ascl1 y Notch1 tienen una participación importante durante este proceso. En el presente estudio, se propone que la hormona de crecimiento (GH) es capaz de potenciar la regeneración de la retina después de un daño por excitotoxicidad. El protocolo para inducir regeneración incluyó una única inyección intravitreal de kainato (KA) (20 g) para inducir excitotoxicidad al día posnatal 1 (P1), seguido por 10 inyecciones de GH (300 ng) del P2 al P16. Las retinas se colectaron al P21 para su análisis por medio de histoquímica, cuantificación de ARNm y cuantificación de proteínas. También se analizaron los cambios en la proliferación celular despues del daño con KA y con el tratamiento con GH, usando un marcaje con BrdU en un protocolo de ocho días con daño agudo con KA y tratamiento crónico con GH. Se confirmó el efecto regenerativo de la GH por medio de morfometría de la retina, en donde se vio que la capa nuclear interna (INL) y la capa plexiforme interna (INP) se recuperaron parcialmente con el tratamiento con GH. Se cuantificaron los cambios relativos en la expresión de ARNm de marcadores de transdiferenciación (Sox2, FGF2, PCNA), marcadores sinaptogénicos (DLG1, SNAP25 y NRXN1), receptores a glutamato (NR1 y GRIK4), factores de protección (BDNF y BMP4) y se analizó la participación de la vía de señalización Notch (Notch1, Ascl-1 y Hes5). Por otro lado, se analizó la inmunoreactividad por Western Blot, de factores de supervivencia (TNF-R2 y Bcl-2) y el marcador sinaptogénico GAP43. Los resultados mostraron que después del daño con excitotoxicidad, la GH es capaz de promover la recuperación de la retina, incrementando la expresión del ARNm de FGF2 y Sox2, aunque no de Ascl1. Además se incrementó la expresión de Notch1 asi como de Hes5. La GH también incrementó los niveles de BDNF, NR1, GRIK4 y DLG1, pero no de los demás genes analizados. Por otro lado se observó el incremento de la inmunoreactividad de Bcl-2, GAP43 y TNF-R2 con el tratamiento crónico de GH. A través del marcaje con BrdU se confirmó que la GH promueve la proliferación después del daño. En resumen, este trabajo muestra que el tratamiento crónico con GH después de un daño por excitotoxicidad, es capaz de potenciar e inducir efectos neuregenerativos y protectores, asociados con la transdiferenciación de la glia de Müller en la retina de pollo.
URI: http://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/1863
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