Title:	Respuesta del gen CchGLP en tabaco transgénico bajo slinidad y toxicidad por metales pesados
metadata.dc.creator:	Diana Saenz De La O
Keywords:	INGENIERÍA Y TECNOLOGÍA CIENCIAS TECNOLÓGICAS
metadata.dc.date:	Nov-2017
metadata.dc.degree.department:	Facultad de Ingeniería
metadata.dc.degree.name:	Maestría en Ingeniería en Biosistemas
Description:	"El desarrollo de cultivos tolerantes a altos niveles de sales metálicas representa una alternativa para asegurar la producción agrícola en suelos contaminados. El objetivo de este trabajo fue investigar la respuesta ante estrés abiótico, específicamente salinidad y toxicidad por metales pesados, de la planta transgénica de Nicotiana tabacum cultivar Xanthi nc que expresa el gen Capsicum chinense Germin-Like Protein (CchGLP). Los tratamientos se aplicaron durante la etapa de germinación, bajo condiciones in vitro, y en etapa de plántula, bajo condiciones de invernadero. Las semillas de este modelo de dos líneas altamente expresivas, L8 y L26, así como una línea acigoto (que alberga el gen, pero no lo expresa), L1, fueron expuestas a diferentes concentraciones de cloruro de cadmio, cloruro de aluminio y cloruro de sodio. Se evaluaron las respuestas fenotípicas para la etapa de germinación en términos de porcentaje de germinación y longitud de raíz. En etapa de plántula se evalúo el vigor midiendo altura de la planta, diámetro basal del tallo y contenido de clorofila en hoja. También se determinó la biomasa vegetativa y radical al finalizar el periodo experimental. Los efectos de los tratamientos de cadmio (Cd) y aluminio (Al) sobre el nivel de metilación del ADN en etapa de germinación se analizaron usando el kit 5-mC DNA ELISA. Durante la germinación y en estadíos tempranos, la línea transgénica L8 fue la línea que fenotípicamente demostró tener mayor tolerancia al estrés por metales pesados. Nuestras observaciones con respecto a la metilación en etapa de germinación sugieren fuertemente que los cambios en el estado de metilación debido al estrés ambiental desencadenan la activación de genes implicados en la resistencia. Sin embargo, es necesaria una evidencia directa adicional para probar esta teoría. En etapa de plántula se hizo evidente bajo el tratamiento con CdCl2 500 μM que la inserción y expresión del gen les confirió a las plantas transgénicas mayor tolerancia durante la etapa de antesis y floración. Así como mayor biomasa vegetativa y mayor vigor y biomasa radicular al finalizar el periodo experimental." "The development of tolerant crops against high levels of metal salts represents an alternative to ensure agricultural production in contaminated soils. The objective of this work was to investigate the response to abiotic stress, specifically salinity and toxicity by heavy metals, of the transgenic plant of Nicotiana tabacum cultivar Xanthi nc that expresses the gene Capsicum chinense Germin-Like Protein (CchGLP). The treatments were applied during the germination stage, under in vitro conditions, and in the seedling stage, under greenhouse conditions. The seeds of this model of two highly expressive lines, L8 and L26, as well as an azygote line (which harbors the gene, but does not express it), L1, were exposed to different concentrations of cadmium chloride, aluminum chloride and sodium chloride. The phenotypic responses for the germination stage were evaluated in terms of germination percentage and root length. In the seedling stage, the vigor was evaluated by measuring the height of the plant, the basal diameter of the stem and the leaf chlorophyll content. The vegetative and radical biomass were also determined at the end of the experimental period. The effects of cadmium (Cd) and aluminum (Al) treatments on the level of DNA methylation at the germination stage were analyzed using the 5-mC DNA ELISA kit. During germination and in early stages, the L8 transgenic line was the line that phenotypically proved to have greater tolerance to heavy metal stress. Our observations regarding methylation during germination strongly suggest that changes in methylation status due to environmental stress trigger the activation of genes involved in resistance. However, additional direct evidence is necessary to prove this theory. In the seedling stage, it became evident under the 500 μM CdCl2 treatment that the insertion and expression of the gene gave the transgenic plants greater tolerance during the anthesis and flowering stage. As well as greater vegetative biomass and greater vigor and root biomass at the end of the experimental period."
URI:	http://ri-ng.uaq.mx/handle/123456789/1147
Other Identifiers:	Nicotiana tabacum c.v. Xanthi nc Tabaco transgénico Tolerancia a aluminio Tolerancia a cadmio Tolerancia a salinidad Metilación del ADN Nicotiana tabacum c.v. Xanthi nc Transgenic tobacco Aluminium tolerance Cadmium tolerance Salinity tolerance DNA-methylation
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